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La beta-D-2'-deossi-2'-fluoro-2'-C-metilcitidina (PSI-6130) è un potente inibitore specifico della sintesi dell'RNA del virus dell'epatite C (HCV) nelle cellule di replicone Huh-7.Per inibire la RNA polimerasi NS5B dell'HCV, il PSI-6130 deve essere fosforilato nella forma 5'-trifosfato.Sono state studiate la fosforilazione di PSI-6130 e l'inibizione di HCV NS5B.La fosforilazione di PSI-6130 da parte della 2'-deossicitidina chinasi umana ricombinante (dCK) e dell'uridina-citidina chinasi 1 (UCK-1) è stata misurata utilizzando una reazione spettrofotometrica accoppiata.PSI-6130 ha dimostrato di essere un substrato per dCK purificato, con un Km di 81 microM e un kcat di 0,007 s-1, ma non era un substrato per UCK-1.Il monofosfato PSI-6130 (PSI-6130-MP) è stato fosforilato in modo efficiente al difosfato e successivamente al trifosfato dalla chinasi UMP-CMP umana ricombinante e dalla chinasi difosfato nucleosidica, rispettivamente.È stata studiata l'inibizione delle RNA polimerasi di HCV NS5B wild-type e mutate (S282T).La costante di inibizione allo stato stazionario (Ki) per PSI-61 30 trifosfato (PSI-6130-TP) con l'enzima wild-type era 4,3 microM.Risultati simili sono stati ottenuti con 2'-C-metiladenosina trifosfato (Ki=1,5 microM) e 2'-C-metilcitidina trifosfato (Ki=1,6 microM).NS5B con la mutazione S282T, nota per conferire resistenza alla 2'-C-metiladenosina, è stata inibita da PSI-6130-TP con la stessa efficienza del tipo selvaggio.L'incorporazione di PSI-6130-MP nell'RNA catalizzata dalla RNA polimerasi NS5B purificata ha provocato l'interruzione della catena.