Prodotti

L'organello di secrezione proteica ExPortal in Streptococcus pyogenes è un microdominio di membrana contenente fosfolipidi anionico arricchito in Sec translocons e fattori di biogenesi proteica postsecrezione.La polimixina B si lega e interrompe l'integrità di ExPortal, con conseguente secrezione difettosa di diverse tossine.Per ottenere informazioni sui fattori che influenzano l'organizzazione di ExPortal, è stato condotto uno screening genetico per selezionare i mutanti spontanei resistenti alla polimixina B che mostrano una maggiore integrità di ExPortal.Il risequenziamento dell'intero genoma di 25 mutanti resistenti ha rivelato da una a quattro mutazioni per genoma mutante raggruppate principalmente all'interno di un nucleo di 10 gruppi di geni.La costruzione di mutanti con delezioni o inserzioni individuali ha dimostrato che 7 geni core conferiscono resistenza e una maggiore integrità ExPortal attraverso la perdita di funzione, mentre 3 erano probabilmente dovuti a guadagno di funzione e/o effetti combinatori.I geni di resistenza del nucleo includono un regolatore trascrizionale della biosintesi dei lipidi, diversi geni coinvolti nell'acquisizione di nutrienti e una varietà di geni coinvolti nelle risposte allo stress.Due membri di quest'ultima classe funzionano anche come nuovi regolatori della proteasi della cisteina SpeB secreta.L'analisi della mutazione più frequentemente isolata, una delezione di un singolo nucleotide in una traccia di 9 residui di adenina consecutivi in ​​pstS, che codifica un componente di un trasportatore Pi ad alta affinità, suggerisce che questa sequenza funzioni come un interruttore molecolare per facilitare l'adattamento allo stress.Insieme, questi dati suggeriscono l'esistenza di una risposta allo stress della membrana che promuove una maggiore integrità e resistenza di ExPortal ai peptidi antimicrobici cationici.