Prodotti

Il trasportatore di glutammato EAAT2 rappresenta >90% dell'assorbimento di glutammato ippocampale.Sebbene EAAT2 sia espresso prevalentemente negli astrociti, circa il 10% delle molecole di EAAT2 si trova nei terminali degli assoni.Nonostante il livello inferiore di espressione di EAAT2 nei terminali glutamatergici, quando le fette ippocampali vengono incubate con una bassa concentrazione di d-aspartato (un substrato EAAT2), i terminali degli assoni accumulano d-aspartato con la stessa rapidità dell'astroglia.Ciò implica una discrepanza inspiegabile tra la distribuzione della proteina EAAT2 e l'attività di trasporto mediata da EAAT2.Un'ipotesi è che (1) l'eteroscambio del substrato interno con il substrato esterno sia considerevolmente più veloce dell'assorbimento netto e (2) i terminali favoriscano l'eteroscambio a causa degli alti livelli di glutammato interno.Tuttavia, al momento non è noto se l'eteroscambio e l'assorbimento abbiano tassi simili o diversi.Per risolvere questo problema, abbiamo utilizzato un sistema ricostituito per confrontare i tassi relativi dei due processi nel ratto e nel topo.L'assorbimento netto era sensibile ai cambiamenti nel potenziale di membrana ed era stimolato da anioni permeabili esterni in accordo con l'esistenza di una conduttanza anionica disaccoppiata.Utilizzando quest'ultimo, dimostriamo anche che il tasso di eteroscambio dipende anche dal potenziale di membrana.Inoltre, i nostri dati suggeriscono ulteriormente la presenza di una perdita di sodio in EAAT2.Incorporando le nuove scoperte nel nostro precedente modello di assorbimento del glutammato da parte di EAAT2, prevediamo che la sensibilità alla tensione dello scambio è causata dal terzo legame Na(+) voltaggio-dipendente.Inoltre, sia i nostri esperimenti che le nostre simulazioni suggeriscono che i tassi relativi di assorbimento netto ed eteroscambio sono comparabili in EAAT2.