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Le cellule eucariotiche contengono un delicato equilibrio di minuscole quantità dei quattro desossiribonucleosidi trifosfati (dNTP), sufficienti solo per pochi minuti di replicazione del DNA.Sia una carenza che un'eccedenza di un singolo dNTP possono comportare un aumento dei tassi di mutazione, una riparazione difettosa del DNA o una deplezione del DNA mitocondriale.I dNTP sono solitamente quantificati mediante un saggio enzimatico in cui l'incorporazione di dATP radioattivo (o dTTP radioattivo nel saggio per dATP) in specifici oligonucleotidi sintetici da parte di una DNA polimerasi è proporzionale alla concentrazione del dNTP sconosciuto.Scopriamo che la DNA polimerasi di Klenow comunemente usata può sostituire il corrispondente ribonucleotide per il dNTP sconosciuto portando in alcuni casi a una grande sovrastima dei dNTP.Descriviamo ora le condizioni di analisi per ogni dNTP che evitano l'incorporazione di ribonucleotide.Per i saggi dTTP e dATP è sufficiente minimizzare le concentrazioni dell'enzima di Klenow e del dATP marcato (o dTTP);per dCTP e dGTP abbiamo dovuto sostituire l'enzima Klenow con la Taq DNA polimerasi o la Thermo Sequenase.Suggeriamo che in alcuni rapporti precedenti l'incorporazione di ribonucleotide potrebbe aver causato valori troppo alti per dGTP e dCTP.