Prodotti

L'approvvigionamento cellulare di deossinucleosidi trifosfati (dNTP) è cruciale per la replicazione e la riparazione del DNA.In questo studio, abbiamo studiato il ruolo della chinasi CMP/UMP (CMPK), un enzima che catalizza la formazione di CDP, nella riparazione del DNA.Il knockdown di CMPK ritarda la riparazione del DNA durante il recupero dal danno UV nelle cellule prive di siero ma non nelle cellule senza privazione di siero.L'apporto esogeno di citidina o deossicitidina facilita la riparazione del DNA dipendente da CMPK nelle cellule prive di siero, suggerendo che la sintesi di dCDP o CDP determina il tasso di riparazione.Tuttavia, il knockdown di CMPK non influisce sul livello di stato stazionario di dCTP nelle cellule prive di siero.Abbiamo quindi trovato la localizzazione di CMPK nei siti di danno al DNA e la sua formazione complessa con Tip60 e ribonucleotide reduttasi.La nostra analisi ha dimostrato che il 32-amminoacido N-terminale di CMPK è necessario per il suo reclutamento nei siti di danno del DNA in modo dipendente da Tip60.La riespressione di CMPK wild-type ma non N-terminale eliminata ripristina l'efficienza della riparazione del DNA nelle cellule knockdown CMPK.Abbiamo proposto che la formazione di dCDP sito-specifica tramite CMPK fornisca un mezzo per facilitare la riparazione del DNA nelle cellule prive di siero.