Prodotti

Il presente studio descrive un metodo semplice ed efficiente che utilizza la cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) accoppiata al rilevamento della fluorescenza per la determinazione dei parametri cinetici dell'assorbimento del glutammato nel tessuto nervoso.Il tessuto retinico ottenuto da pulcini di 7 giorni è stato incubato con concentrazioni note di glutammato (50-2000 μM) per 10 minuti e sono stati misurati i livelli del neurotrasmettitore derivatizzato da o-ftaldeide (OPA) nel mezzo di incubazione.Valutando la differenza tra le concentrazioni iniziali e finali di glutammato nel mezzo, è stato caratterizzato un meccanismo di assorbimento saturabile (K(m)=8.2 e V(max)=9.8 nmol/mg proteina/min).Questa misura era in gran parte dipendente dal sodio e dalla temperatura, sostenendo fortemente che il meccanismo per il decremento della concentrazione è effettivamente l'assorbimento da parte dei trasportatori ad alta affinità.In aggiunta a questo, i nostri risultati hanno anche dimostrato che il cloruro di zinco (un inibitore dei trasportatori di glutammato/aspartato) ha evocato una diminuzione dipendente dalla concentrazione nell'assorbimento di glutammato te, dimostrando la specificità della nostra metodologia.Nel complesso, il presente lavoro caratterizza una metodologia alternativa per valutare l'assorbimento del glutammato nel tessuto nervoso mediante HPLC.Questo approccio potrebbe essere uno strumento importante per gli studi associati alla caratterizzazione delle minime alterazioni nel trasporto del glutammato correlate a lesioni del sistema nervoso centrale.