Prodotti

La differenziazione dei fibroblasti orbitali in adipociti maturi e il successivo accumulo di tessuto adiposo è stata dimostrata nella progressione dell'orbitopatia di Graves (GO).L'autofagia è coinvolta nell'adipogenesi, ma si sa poco sul ruolo dell'autofagia nell'inizio e nella progressione della GO.Lo scopo di questo studio è quello di indagare il ruolo dell'autofagia nella patogenesi della OB. Sono stati analizzati espianti di tessuto adiposo/connettivo orbitale da pazienti con OB e da soggetti normali, nonché fibroblasti orbitali isolati.L'adipogenesi è stata indotta utilizzando un mezzo di differenziazione con o senza perossido di idrogeno e l'autofagia è stata manipolata utilizzando bafilomicina A1 e RNA a forcina corta mirato ad Atg5 (shRNA).Gli autofagosomi sono stati identificati mediante microscopia elettronica.L'espressione di geni correlati all'autofagia e fattori di trascrizione correlati all'adipogenesi sono stati analizzati mediante reazione a catena della polimerasi di trascrizione inversa in tempo reale e/o analisi Western blot.L'accumulo di goccioline lipidiche è stato esaminato mediante colorazione Oil Red O. I vacuoli autofagici erano più abbondanti nelle cellule GO che nelle cellule non GO (p<0,05).L'espressione dei geni correlati all'autofagia era significativamente più alta nei tessuti e nelle cellule GO rispetto alle loro controparti non GO, rispettivamente.L'interleuchina-1β ha aumentato la proteina LC3-II, p62 e Atg7 nelle cellule GO.L'accumulo di autofagosoma è stato mostrato al giorno 4 dell'adipogenesi e diminuito al giorno 10, insieme alla formazione di goccioline lipidiche.L'espressione delle proteine ​​LC3 e p62 è aumentata entro 48 ore dalla differenziazione ed è diminuita gradualmente dal giorno 4 al 10. Il trattamento con bafilomicina A1 e il knockdown di Atg5 mediante shRNA hanno inibito l'accumulo di goccioline lipidiche e soppresso l'espressione di marcatori adipogenici. L'autofagia è stata aumentata nel tessuto e nelle cellule GO rispetto a tessuto e cellule non GO, suggerendo che l'autofagia svolge un ruolo nella patogenesi della GO.La manipolazione dell'autofagia può essere un bersaglio terapeutico per la GO.