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In precedenza abbiamo stabilito una coltura tridimensionale a lungo termine di organoidi da tessuti di topo (intestino, stomaco, pancreas e fegato) e intestino e pancreas umani.Qui descriviamo le condizioni necessarie per la coltura tridimensionale a lungo termine delle cellule staminali gastriche umane.La tecnologia può essere applicata per studiare la risposta epiteliale all'infezione da Helicobacter pylori. Abbiamo generato organoidi da campioni chirurgici di corpus gastrico umano.Le condizioni di coltura sono state sviluppate sulla base di quelle del sistema gastrico e intestinale umano del topo.Abbiamo usato la microiniezione per infettare gli organoidi con H pylori.Le risposte epiteliali sono state misurate utilizzando microarray e analisi quantitative della reazione a catena della polimerasi. Le cellule gastriche umane sono state espanse indefinitamente in colture tridimensionali.Abbiamo coltivato cellule da tessuti gastrici sani, cellule staminali selezionate singolarmente o tessuti tumorali.Gli organoidi hanno mantenuto molte caratteristiche dei rispettivi tessuti in base alla loro istologia, espressione di marcatori ed euploidia.Gli organoidi del tessuto sano esprimevano marcatori di 4 lignaggi dello stomaco e si auto-organizzavano nei domini della ghiandola e della fossetta.Potrebbero essere diretti a esprimere specificamente i lignaggi della ghiandola gastrica o della fossa gastrica, mediante l'aggiunta di nicotinamide e il ritiro di WNT.Sebbene i lignaggi della fossa gastrica abbiano avuto solo reazioni marginali all'infezione batterica, i lignaggi delle ghiandole gastriche hanno montato una forte risposta infiammatoria. Abbiamo sviluppato un sistema per coltivare organoidi gastrici umani.Questo sistema può essere utilizzato per studiare l'infezione da H pylori e altre patologie gastriche.Copyright © 2015 AGA Institute.Pubblicato da Elsevier Inc. Tutti i diritti riservati.