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Attività biologica: BCIP (BCIP sale p-toluidina; X-fosfato sale p-toluidina) è un substrato cromogenico per il rilevamento colorimetrico dell'attività della fosfatasi alcalina.

Le tossine Shiga (Stxs) sono prodotte da Escherichia coli enteroemorragico (EHEC), che causano infezioni umane con esito spesso fatale.Le linee cellulari Vero, derivate dal rene di scimmia verde africana, rappresentano il gold standard per determinare gli effetti citotossici di Stxs.Nonostante il loro uso globale, la conoscenza delle strutture esatte dei glicosfingolipidi del recettore Stx (GSL) e del loro assemblaggio nelle zattere lipidiche è scarsa.Qui presentiamo un'analisi strutturale completa dei GSL del recettore Stx e della loro distribuzione alle membrane resistenti ai detergenti (DRM), che sono state preparate dalle cellule Vero-B4 e utilizzate come equivalenti della zattera lipidica.Abbiamo identificato globotriaosilceramide (Gb3Cer) e globotetraosilceramide (Gb4Cer) come recettori GSL per i sottotipi Stx1a, Stx2a e Stx2e utilizzando il rilevamento della sovrapposizione di TLC combinato con MS.Il raro recettore Stx, globopentaosilceramide (Gb5Cer, Galβ3GalNAcβ3Galα4Galβ4Glcβ1Cer), che è stato specificamente riconosciuto (oltre a Gb3Cer e Gb4Cer) da Stx2e, è stato completamente caratterizzato strutturalmente.È stato scoperto che le lipoforme dei GSL del recettore Stx ospitano principalmente porzioni di ceramide composte da sfingosina (d18: 1) e acido grasso C24: 0 / C24: 1 o C16: 0.Inoltre, la co-occorrenza con marcatori di zattera lipidica, SM e colesterolo, nei DRM ha suggerito l'associazione di GSL con microdomini di membrana.Questo studio fornisce la base per esplorare ulteriormente l'impatto funzionale dei recettori Stx associati alla zattera lipidica per il danno mediato dalla tossina delle cellule Vero-B4.