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1. Abbiamo studiato gli effetti inibitori dell'isoramnetina sulla tirosinasi dei funghi mediante cinetica di inibizione e simulazione computazionale.L'isoramnetina ha inibito in modo reversibile la tirosinasi in modo misto a Ki=0,235±0,013 mM.Le misurazioni della fluorescenza intrinseca e di legame dell'1-anilinonaftalene-8-solfonato (ANS) hanno mostrato che l'isoramnetina non ha indotto cambiamenti significativi nella struttura terziaria della tirosinasi.Per ottenere informazioni sul processo di inattivazione, la cinetica è stata calcolata tramite misurazioni di intervalli di tempo e reazioni continue del substrato.I risultati hanno indicato che l'inattivazione indotta dall'isoramnetina era una reazione di primo ordine con processi bifasici.Per ottenere ulteriori informazioni, abbiamo simulato l'attracco tra tirosinasi e isorhamnetin.La simulazione ha avuto successo (energie di legame per Dock6.3: -32,58 kcal/mol, per AutoDock4.2: -5,66 kcal/mol e per Fred2.2: -48,86 kcal/mol), suggerendo che l'isoramnetina interagisce con diversi residui, come come HIS244 e MET280.Questa strategia di previsione dell'interazione della tirosinasi in combinazione con la cinetica basata su un composto flavanonico potrebbe rivelarsi utile nello screening di potenziali inibitori naturali della tirosinasi.

2. Il percorso di dispiegamento acido della conalbumina (CA), una glicoproteina monomerica dell'albume di gallina, è stato studiato utilizzando la spettroscopia CD nel lontano e vicino UV, l'emissione di fluorescenza intrinseca, la sonda di fluorescenza estrinseca 1-anilino-8-naftalene sulfonato (ANS) e diffusione dinamica della luce (DLS).Osserviamo i cambiamenti dipendenti dal pH nella struttura secondaria e terziaria di CA.Ha una struttura secondaria α-elica nativa a pH 4,0 ma una struttura di perdita a pH 3,0.La CA esisteva esclusivamente come stato di globuli pre-fusi e stato di globuli fusi in soluzione a pH 4,0 e pH 3,0, rispettivamente.L'effetto del pH sulla conformazione e termostabilità di CA punta verso la sua resistenza al calore a pH neutro.I risultati DLS mostrano che lo stato MG esisteva come forma compatta in soluzioni acquose con raggi idrodinamici di 4,7 nm.L'estinzione della fluorescenza del triptofano da parte dell'acrilammide ha ulteriormente confermato l'accumulo di uno stato intermedio, parzialmente non ripiegato, tra gli stati nativi e non ripiegati.